第一法大腸菌群檢驗(yàn)MPN法
新老標(biāo)準(zhǔn)異同
原方法：MPN/ 100g(mL)
現(xiàn)方法：MPN/ g(mL)
操作過(guò)程請(qǐng)大家仔細(xì)閱讀 GB4789.3-2010
1.MPN法注意事項(xiàng)：
?全過(guò)程不得超過(guò)15min。
?樣品勻液的pH值應(yīng)在6.5～7.5之間，
?（如接種量需要超過(guò)1mL，則用雙料LST肉湯）
?以48h±2h為最終觀察結(jié)果時(shí)限。結(jié)果也以此時(shí)為最終結(jié)果
2.MPN法培養(yǎng)基：LST、BGLB
（1）月桂基磺酸鹽胰蛋白胨（LST）
月桂基磺酸鈉能抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)，同時(shí)比膽鹽的選擇性和穩(wěn)定性好。由于膽鹽與酸產(chǎn)生沉淀，沉淀有時(shí)候會(huì)使對(duì)產(chǎn)氣情況的觀察變得有些困難；
?乳糖是大腸菌群可利用發(fā)酵的糖類(lèi)。有利于大腸菌群的生長(zhǎng)繁殖并有助于鑒別大腸菌群和腸道致病菌；
?胰蛋白胨提供基本的營(yíng)養(yǎng)成分；
?LST肉湯是國(guó)際上通用的培養(yǎng)基，與乳糖膽鹽肉湯的作用和意義相同，但具有更多的優(yōu)越性。
?發(fā)酵試驗(yàn)判定原則：產(chǎn)氣為陽(yáng)性。
?檢測(cè)步驟減少（不必分離培養(yǎng)），檢測(cè)時(shí)間縮短24h。
?注：如接種量超過(guò)1mL，則應(yīng)用雙料LST肉湯
（2）煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB）
膽鹽可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌。
?煌綠是抑菌抗腐劑，可增強(qiáng)對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌的抑制作用。
?乳糖是大腸菌群可利用發(fā)酵的糖類(lèi)。有利于大腸菌群的生長(zhǎng)繁殖并有助于鑒別大腸菌群和腸道致病菌。
?發(fā)酵試驗(yàn)判定原則：產(chǎn)氣為陽(yáng)性。由于配方里有膽鹽，膽鹽遇到大腸菌群分解
?乳糖所產(chǎn)生的酸形成膽酸沉淀，培養(yǎng)基可由原來(lái)的綠色變?yōu)辄S色，同時(shí)可看到管底通常有沉淀。
3.MPN檢索表的應(yīng)用
?MPN（最可能數(shù)most probable number）是表示樣品中活菌密度的估測(cè)。因此MPN值只是活菌密度的估算值，并不是樣品中活菌數(shù)的真值。
4.使用MPN檢索表的注意點(diǎn)
?這個(gè)MPN檢索表是ISO、FDA、AOAC、USDA/FSIS、北歐等標(biāo)準(zhǔn)通用的。
?表里的數(shù)字是有小數(shù)點(diǎn)的。
?報(bào)告單位不同。現(xiàn)報(bào)告單位為g/ml，而原報(bào)告單位是100g/ml。
?原標(biāo)準(zhǔn)MPN表有64個(gè)組合，而現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)MPN表只有40個(gè)組合。
當(dāng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果在MPN表中無(wú)法查找到MPN值時(shí)，如：陽(yáng)性管數(shù)為122，123，232，233等時(shí)，建議增加稀釋度(可做4~5個(gè)稀釋度)，使樣品的最高稀釋度能達(dá)到獲得陰性終點(diǎn)(如果污染程度不能判定，則多加一稀釋度)，然后再遵循相關(guān)的規(guī)則進(jìn)行查找，最終確定MPN值。
文章摘自《食品論壇》
400-081-4789
